Abstrakt

Dieser Bericht bietet eine detaillierte technische Analyse des toxikologischen und genotoxikologischen Profils von Pektin-abgeleiteten sauren Oligosacchariden (PAOS), einer spezifischen Form von modifiziertem Zitruspektin. Die Analyse basiert auf der umfassenden Sicherheitsbewertung von Garthoff et al. InRegulatorische Toxikologie und Pharmakologie (2010).¹Zu den Hauptschwerpunkten zählen die physikalisch-chemische Charakterisierung und das Reinheitsprofil des Materials sowie eine kritische Interpretation der Divergenz

in vitrogegenin vivoGenotoxizitätsdaten und die mechanistische Aufklärung einer artspezifischen Urothelhyperplasie, die in Nagetiermodellen beobachtet wurde. Die Daten ergeben insgesamt ein robustes Sicherheitsprofil für diesen neuartigen präbiotischen Inhaltsstoff.

Materialcharakterisierung und Reinheitsprofil

Das in den entscheidenden Sicherheitsstudien bewertete PAOS-Präparat wurde aus Pektin in Lebensmittelqualität mithilfe einer spezifischen enzymatischen Methode hergestellt. Das Verfahren nutzt Poly(methoxyl- -galacturonid)lyase (EC 4.2.2.10) und Poly(1,4-alpha-D-galacturonid)glycanhydrolase (EC 3.2.1.15), die beide von nicht-pathogenen, nicht toxikogenen Stämmen von abgeleitet sindAspergillus niger.¹Das resultierende Produkt ist eine Mischung aus linearen Oligomeren von Galacturonsäure mit wichtigen Identitätsspezifikationen, darunter ein Galacturonsäuregehalt von 62 g/100 g, ein Molekulargewicht überwiegend unter 3800 Da (94 g/100 g) und ein Methylierungsgrad von 50.¹

Bei jedem Material, das für Ernährungs- oder Forschungsanwendungen bestimmt ist, ist das Reinheitsprofil von größter Bedeutung. Die in den Studien verwendete Charge von PAOS wurde gründlich auf Verunreinigungen und Rückstände analysiert. Die Ebenen vonmodifizierte Zitruspektin-SchwermetalleEs wurde festgestellt, dass der Gehalt an Schadstoffen und anderen Schadstoffen außergewöhnlich niedrig ist und den Grundsätzen der einschlägigen Gesetzgebung und der guten landwirtschaftlichen Praxis entspricht.¹Nachfolgend finden Sie eine Zusammenfassung dieser Ergebnisse.

Daten entnommen aus Garthoff et al., 2010¹

Der niedrige Gehalt an wichtigen Schwermetallen wie Cadmium, Blei und Quecksilber im Mikrogramm-pro-Kilogramm unterstreicht die Reinheit des Rohmaterials und des Herstellungsprozesses.

Eine kritische Analyse der Genotoxizitätsdaten

Die Genotoxizitätsbewertung von PAOS ergab Ergebnisse, die die Bedeutung der Berücksichtigung des gesamten toxikologischen Bildes, insbesondere der Beziehung zwischen diesen, unterstreichenin vitroUndin vivoDaten. PAOS war im bakteriellen Rückmutationstest (Ames-Test) bei fünf Stämmen mit und ohne metabolische Aktivierung schlüssig nicht mutagen.¹

Allerdings ist diein vitroUntersuchungen an Säugetierzellen führten zu komplexeren Ergebnissen. Der Maus-Lymphom-Assay wurde aufgrund positiver Reaktionen bei hochzytotoxischen Konzentrationen, die nicht reproduzierbar waren und keine eindeutige Dosis-{1}Wirkungsbeziehung aufwiesen, als „zweideutig“ eingestuft.¹Auch im Chromosomenaberrationstest mit CHO-Zellen galt PAOS unter kontinuierlichen Behandlungsbedingungen zunächst als klastogen. Eine Folgeuntersuchung ergab, dass dieser Effekt stark von der Zytotoxizität und dem verwendeten Lösungsmittel (DMSO) abhängt. Wenn PAOS in Kulturmedium suspendiert wurde -ein physiologisch relevanteres Vehikel-, wurde ein signifikanter Anstieg an aberranten Zellen nur bei der höchsten empfohlenen Dosis beobachtet (

5000 ug/ml) und war mit einer hohen Zytotoxizität (MI von 34 %) verbunden, was die Autoren zu dem Schluss führte, dass es biologisch nicht relevant war.¹Diese Erkenntnisse deuten auf das Positive hin

in vitroBei den Ergebnissen handelte es sich wahrscheinlich um Artefakte, die auf Zytotoxizität zurückzuführen waren, einem bekannten Störfaktor bei solchen Tests.

Das endgültige In-vivo-Sicherheitsprofil

Die physiologisch relevantesten Daten zur Beurteilung des genotoxischen Risikos stammen ausin vivoStudien. In die 13-wöchige subchronische orale Toxizitätsstudie an Ratten wurde ein Mikrokerntest integriert, ein Design, das eine längere Exposition gegenüber der Testsubstanz und ihren Metaboliten gewährleistet. Die Studie, zu der auch eine gehörteim UterusDie Expositionsphase zeigte, dass PAOS keinen Einfluss auf die Gesundheit der Eltern, die Fruchtbarkeit, die Fortpflanzung oder die Eigenschaften der Jungtiere hatte.¹Am wichtigsten ist die Analyse femoraler Knochenmarkszellen von Ratten in der Hochdosisgruppe (10 % PAOS in der Nahrung, eine Aufnahme von mehr als 10 %).

7 g/kg KG/Tag) ergab keinen Anstieg der mittleren Anzahl mikrokernhaltiger polychromatischer Erythrozyten im Vergleich zu Kontrollen.¹Darüber hinaus war das Verhältnis von polychromatischen zu normochromatischen Erythrozyten unverändert, was auf keine Zytotoxizität für das Knochenmark hindeutet.¹Dieses Negativ

in vivoDas Ergebnis liefert den endgültigen Beweis dafür, dass PAOS unter physiologischen Bedingungen keine genotoxische Aktivität besitzt.

Mechanistische Aufklärung eines art-spezifischen Artefakts

Die sub-chronische Studie ergab eine diffuse Urothelhyperplasie bei Ratten, denen 10 % PAOS verabreicht wurde. Es wurde angenommen, dass es sich hierbei nicht um einen Indikator für die direkte Toxizität der Oligosaccharide, sondern um einen sekundären Effekt handelte. Eine ergänzende mechanistische Studie sollte die Hypothese testen, dass die Hyperplasie durch den gleichzeitigen Anstieg der Natriumkonzentration und des pH-Werts im Urin verursacht wurde, ein Zustand, der bekanntermaßen diesen spezifischen Effekt bei Ratten hervorruft.¹Die Studie umfasste eine Gruppe, die 10 % PAOS plus das Säuerungsmittel erhielt

NH4​Cl. Die Ergebnisse waren eindeutig: der niedrige pH-Wert im Urin in der NH4​Cl-Gruppeverhinderte vollständig die Entwicklung einer Urothelhyperplasie.¹Dies bestätigte den Mechanismus und zeigte, dass der Effekt nicht dem PAOS eigen ist, sondern ein artspezifisches Artefakt der Harnphysiologie ist, das für den Menschen nicht als relevant angesehen wird.¹

Die in diesen Studien gezeigte Genauigkeit spiegelt das wissenschaftliche Engagement führender Hersteller wie Zhejiang Gold Kropn Biotechnology Co., Ltd. wider. Als nationales High-{2}}Unternehmen, das mit erstklassigen Universitäten zusammenarbeitet, legt das Unternehmen nicht nur Wert auf die Herstellung, sondern auch auf ein tiefes wissenschaftliches Verständnis seiner Produkte. Der Einsatz fortschrittlicher enzymatischer Hydrolyse in einer 100.000 -GMP-zertifizierten Anlage- gewährleistet die Produktion eines hochreinen Produktsmodifiziertes Zitruspektingeeignet für anspruchsvolle Forschungs- und Entwicklungsanwendungen. Um technische Spezifikationen oder ein Analysezertifikat anzufordern oder Forschungskooperationen zu besprechen, wenden Sie sich bitte an wilson@zjgykp.com.

Fazit: Ein gut-charakterisierter Inhaltsstoff für Forschung und Entwicklung

Modifiziertes Zitruspektin (PAOS) ​​ist ein Material mit einem gründlich untersuchten und günstigen Sicherheitsprofil. Die umfassenden Daten zeigen, dass es nicht-mutagen istin vivo, und potenzielle Bedenken vonin vitroTests wurden als Artefakte der Zytotoxizität rationalisiert. Die Beobachtung der Urothelhyperplasie bei Ratten wurde mechanistisch als artspezifische Reaktion auf veränderte Harnchemie erklärt und ist für den Menschen nicht relevant. Die hohe Reinheit des Materials und der äußerst geringe Gehalt an Verunreinigungen, einschließlich Schwermetallen, machen es zu einem gut-charakterisierten und zuverlässigen Inhaltsstoff für weitere Forschung und Entwicklung in den Bereichen Ernährung und Pharmakologie.

Zitierte Werke

Pektinsicherheit 1.pdf